ACTIVIDAD N.9 TÉCNICA DE LA IDENTIFICACIÓN DE GLUCOSA EN ORINA

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS NO.48

FACILITADOR: ING. HERIBERTO CORTÉS OJEDA

ASIGNATURA: BIOQUÍMICA

“TÉCNICA DE LA IDENTIFICACIÓN DE GLUCOSA EN ORINA”

SEMESTRE: 6º                            GRUPO: “J”

ESPECIALIDAD: LABORATORISTA QUÍMICO

EQUIPO  N. 4

INTEGRANTES:

·        DIAZ BIBIANO VIRIDIANA

·        DOMINGUEZ PINEDA CARMEN ALEJANDRA

·        GARCÍA PERALTA NATALÍA DE JESÚS

·        MORALES DOMINGUEZ YARICEL

·        POXTAN FARFÁN MARÍA ESTHER

CALIFICACIÓN: ____________________________

ACAYUCAN, VER. A 26 DE MAYO DE 2011

PRACTICA N. 1

IDENTIFICACIÓN DE GLUCOSA EN LA ORINA

OBJETIVO:

Al término de la práctica el alumno aprenderá a identificar la glucosa en la orina, mediante reacciones reductoras.

INTRODUCCIÓN:

La presencia de cantidades significativas en glucosa en la orina se denomina glucosuria (glicosuria). La cantidad de glucosa que aparece en la orina depende del nivel de glucemia, de la velocidad de filtración glomerular y del grado de reabsorción tubular. Por lo general no existe glucosa en la orina hasta que el nivel de glucosa en la sangre supera los 160-180mg/dl, cifra que es el umbral renal normal para la glucosa. Cuando el valor de glucemia supera el umbral renal, los túbulos no pueden reabsorber toda la glucosa filtrada, y se produce glusuria. Normalmente este nivel no es sobre pasado, aun después de la ingesta de grandes cantidades e hidrato de carbono. Puede existir una cantidad pequeña de glucosa en la orina normal, pero el nivel de ayuno en un adulto es de sólo alrededor de 2-20 mg de glucosa por 100ml de orina para comprender la presencia de glucosa en la orina lo mejor es revisar en primer lugar la fuente de glucosa que se encuentra en la sangre. Existen tres fuentes principales de glucosa sanguínea: 1) La digestión de almidones y de hidratos de carbono produce glucosa que es absorbida desde el intestino; 2) La gluconeogénesis, que es la conversión de precursores diferentes de los hidratos de carbono en glucosa, por ejemplo, proteína y grasa; y 3) La glucogenólisis, es decir la hidrólisis e glucógeno almacenado en el hígado.

Determinación de sustancias reductoras

Las pruebas de reducción del cobre, Clinitest y Benedict, se utilizan para la determinación de glucosa pero también detectan cualquier otra sustancia reductora que pueda estar presente.
Para determinar si una prueba de reacción con cobre positiva se debe a la presencia de glucosa o a la de otra sustancia reductora, debe correlacionarse con los resultados obtenidos en pruebas de glucosa oxidasa. A continuación se presenta una lista con los posibles resultados junto a su interpretación.

Glucosa oxidasa	Reducción del cobre	Interpretación
+	+	Glucosa
-	+	Sustancias reductoras diferentes de la glucosa (salvo que haya acido ascórbico en la muestra).
+	-	Glucosa en pequeñas cantidades

Los métodos para utilizados para determinar sustancias reductoras se basan en el hecho de que en soluciones fuertemente alcalinas y en presencia de calor, los azúcares reductores producen la reducción de iones cúpricos en oxido cuproso. La reacción provoca un cambio de color del azul al anaranjado (o rojo) pasando por el verde, lo cual depende de la cantidad de sustancias reductoras presentes en la orina.

TABLETAS CLINITEST

Clinitest es un método de auto calentamiento para la determinación cuantitativa de sustancias reductoras en la orina. Las tabletas contienen los siguientes reactivos: sulfato de cobre, hidróxido de sodio y carbonato de sodio. Cuando se colocan en una mezcla de agua y orina se disuelven con rapidez por la acción del carbonato de sodio y del acido cítrico que actúan como efervescente. El hidróxido de sodio proporciona el medio alcalino necesario para la reacción, y el calor requerido es proporcionado por la reacción del hidróxido de sodio con el agua y el acido cítrico. Las sustancias reductoras presentes en la orina reaccionan con el sulfato de cobre reduciendo los iones cúpricos a oxido cuproso.

MATERIAL:                                                                       REACTIVOS:

Ÿ1 Tubo de ensayo                                                            Ÿ1 Tableta Clinitest
Ÿ1Gotero                                                                         
                                                                                           SUSTANCIAS:

                                                                                            ŸOrina
                                                                                            ŸAgua destilada

TÉCNICA:

1.    Colocar 5 gotas de orina en un tubo de ensayo (o bien 0.3 ml).

2.    Agregar 10 de agua (o 0.6 ml) y mezclar agitando.

3.    Colocar una tableta de Clinitest en el tubo y observar la reacción completa. No agitar el tubo durante la reacción o hasta 15 segundos después de que haya finalizado la ebullición. Se deben tomar precauciones porque el fondo del tubo se torna muy caliente.

4.    Al finalizar el periodo de 15 segundos de espera, agitar el tubo suavemente para luego comparar el color obtenido con la carta de colores. La prueba se informa con negativa, ¼ % (o trazas), ½ % (1 +); ¾ % (2 +); 1% (3+), o 2% (4 +). Si durante la reacción el color pasa rápidamente del anaranjado brillante al marrón oscuro o marrón verdoso, informar el resultado como superior al 2%.  (fenómeno de passthrough o de “pasaje”.)

NOTA: Si no se observa la reacción mientras se está produciendo las lecturas pueden ser falsamente bajas. El fenómeno del “pasaje” del anaranjado brillante al marrón oscuro o marrón verdoso puede ser tan rápido que es posible pasarlo por alto si no se la reacción atentamente. 

REPORTE CON ESQUEMAS:

CONCLUSIÓN:

CUESTIONARIO:

1.    ¿Qué es la glucosuria?

R= es la presencia de cantidades significativa de glucosa en la orina.

2.    ¿Cuáles son las tres funciones principales de glucosa sanguínea?

 R= 1) La digestión de almidones y de hidratos de carbono produce glucosa que es absorbida desde el intestino; 2) La gluconeogénesis, que es la conversión de precursores diferentes de los hidratos de carbono en glucosa, por ejemplo, proteína y grasa; y 3) La glucogenólisis, es decir la hidrólisis e glucógeno almacenado en el hígado.

3.    ¿De qué depende la cantidad de glucosa que aparece en la orina?

R= del nivel de glucemia, de la velocidad de filtración glomerular y del grado de reabsorción tubular.

4.    ¿En qué se basan los métodos utilizados para detectar sustancias reductoras?

R= se basan en el hecho de que en soluciones fuertemente alcalinas y en presencia de calor, los azúcares reductores producen la reducción de iones cúpricos en óxido cuproso.

5.    ¿En qué se basa el método de Clinitest?

R= se basa en el auto calentamiento para la determinación semicuantitativa de sustancias reductoras en la orina.

BIBLIOGRAFÍA:

·         Brandt, R.: Guyer, K.E; Branks, W.L., Jr.

Urinary glucose and vitamin C.

Am. Jr. Clin. Pathol

·         Nahata, M.C.; McLeod, D.C.

Noneffect of oral uninary copper ascorbic test.

Diabetes Care.